人腫瘤壞死因子α轉化酶科研ELISA試劑盒

【產品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本中人腫瘤壞死因子α轉化酶的含量。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費代測服務，歡迎咨詢、訂購！

產品詳情：

【產品名稱】：人腫瘤壞死因子α轉化酶科研ELISA試劑盒

【產品規格】：96T/盒：可檢測90個樣；48T/盒：可檢測42個樣

【特異性】:可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。

【保存條件】：2~8℃，保質期為6個月，均提供最新批次。

【待檢樣本】：組織勻漿、血清、血漿、尿液、腦脊液、胸腹水、細胞培養上清等相關液體樣本。

【產品特點】：靈敏度高，反應性快，操作簡單。

【適用范圍】：僅供科學研究使用，不得用于臨床。

【特色服務】：免費代測，支持定制

實驗材料與試劑配制：

1.  儀器與材料：酶標儀（使用前預熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。

2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

樣品收集、處理及保存：

【細胞培養上清】：適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

【血清】：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。

【血漿】：應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

 【體液】：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

 【樣本要求】：樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

 【樣本保存】：如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-80 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀，應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

人腫瘤壞死因子α轉化酶科研ELISA試劑盒組成及試劑配備：（檢測范圍請參考說明書）

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注意事項：

1）嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果，所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃，使用后立即冷藏保存試劑。

2）洗板不正確可以導致不準確的結果，在加入底物前確保盡量吸干孔內液體，溫育過程中不要讓微孔干燥。

3）消除底板殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

4）底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。

5）避免試劑盒標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

6）任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體，避免影響試劑中的生物活性。

7）平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

 關于做ELISA標準曲線時需要注意的細節問題：

1. 設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能覆蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內，包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度*陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內。

2. 檢測標準樣品時，應按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。

3. 標準曲線的樣品數一般為7個點，但至少要保證有5個點。

4. 做出的標準曲線相關系數因實驗要求不同而有所變動，但一般來說，相關系數R至少要大于0.98，對于有些實驗，至少要0.99甚至時0.999.

5. 樣品的濃度等指標時根據標準曲線計算出來的，所以首先要把做標準曲線看作時比做正式實驗還要重要的一件事，否則后面的實驗結果無從談起。

6. *采用倍比稀釋法配置標準曲線中的標準品濃度，這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現較大的偏離。

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